Kako uporabljati stekleničko s serumom za inaktivacijo seruma
Kot hranilo, potrebno za celično rast, je vloga seruma v celični kulturi samoumevna, kakovost in sterilnost seruma pa sta tudi ključna za določanje uspeha poskusa. Torej, kako inaktivirati serum? To zahteva uporabo stekleničk s serumom.
Koraki za inaktivacijo seruma so naslednji:
1. Za kontrolno stekleničko izberite stekleničko, ki je enaka steklenički seruma, v kontrolno stekleničko nalijte enako količino destilirane vode kot je serum in izmerite temperaturo.
2. Nastavitev temperature. V steklenico kontrolne skupine vstavite dva živosrebrna termometra in ju postavite v vodno kopel. Ko termometer pokaže 56 stopinj, nastavite temperaturo kalibracijske vodne kopeli na 56 stopinj.
3. Stekleničko s serumom in kontrolno stekleničko postavite skupaj v vodno kopel, nastavite temperaturo na 56 stopinj in se pol ure kopajte v vodni kopeli. Po inaktivaciji jih razdelite v steklenice, izvedite aseptične poskuse in jih shranite pri -70--20 stopinjah.
4. Za opazovanje barve in prosojnosti zamrznjenega seruma, če je barva rdečkasta ali je barva svetlejša s padavinami, to pomeni, da kakovost seruma ni dobra, zato je treba izbrati kakovosten serum za inaktivacijo. .
5. Pri uporabi seruma se je treba izogibati večkratnemu odmrzovanju, ki bo povečalo verjetnost kontaminacije seruma in zmanjšalo kakovost seruma. Ko se večkrat odmrznjeni serum izloči, pomeni, da seruma ni na voljo ali je slabe kakovosti.
6. Da bi zagotovili stabilnost eksperimentalnih rezultatov, zagotovite, da je treba serum pri razdeljevanju stekleničke dobro pretresti, nato pa stekleničko razdelite in poskusite uporabiti isti serum, da zagotovite načelo enotnih spremenljivk.
Zgoraj so navedeni posebni koraki inaktivacije seruma z uporabo serumskih stekleničk, vendar je treba omeniti, da v večini celičnih kultur toplotna inaktivacija seruma ni potrebna. V mnogih primerih toplotna inaktivacija ne izboljša rasti celic, temveč uniči serum in poveča precipitacijo. Razen če literatura navaja uporabo inaktiviranega seruma za celice, se lahko stopnja toplotne inaktivacije seruma za celično kulturo na splošno izpusti.
