Uporaba stekleničke s serumom
Steklenička s serumom je izdelana iz borosilikatnega stekla z nizko ekstrakcijo, brezbarvna prozorna steklenička pa izpolnjuje zahteve USP tipa I in ASTM E 438 tipa I standardnega razreda A. Lahko se avtoklavira pri 121 stopinjah 20 minut in se lahko razdeli na 125 ml. , 250ml, 500ml, 1L, 2L glede na prostornino.
Plastenka s serumom je posoda za shranjevanje seruma, ki je običajno narejena iz PET materiala z injekcijskim raztegljivim pihanjem. Medij je hranilo, potrebno za rast celic. Glede na izvor ga delimo na sintetični medij in naravni medij, oba pa lahko shranjujemo v stekleničkah s serumom.
Steklenička s serumom
Naravni medij:
Najpogosteje uporabljen naravni medij je serum, v bistvu telečji serum. Serum vsebuje številne rastne faktorje celic, faktorje, ki spodbujajo adhezijo, in njihove multiaktivne snovi. V kombinaciji s sintetičnim medijem se lahko celice nemoteno razmnožujejo in rastejo. Serum je treba hraniti v posebnih steklenicah s serumom pri -5 stopinjah do -20 stopinjah.
Sintetični medij:
Sintetični medij je strogo oblikovan glede na vrsto in količino snovi, ki jih potrebujejo celice. Obstaja veliko vrst in znanih komponent, kar olajša nadzor eksperimentalnih pogojev. Vsebuje ogljikove hidrate, aminokisline, lipide, anorganske soli, vitamine, elemente v sledovih in rastne faktorje celic. Vendar v primerjavi z naravnim medijem nekaterih naravnih neznanih sestavin ni mogoče nadomestiti z znanimi kemičnimi sestavinami. Zato mora osnovni sintetični medij, ki se uporablja v celični kulturi, dodati tudi določeno količino sestavin naravnega medija, da premaga sintetično kulturo. Nezadostna osnova, najpogostejša praksa je dodajanje telečjega seruma.
Oblika stekleničke s serumom je kvadratna, enostavna za prijem, odporna na večino kislinske in alkalne korozije, temperatura krhkosti je -70 stopinj in ima še vedno določeno žilavost pri -30 stopinjah. Je dobra embalaža, ne glede na to, ali je naravni medij ali sintetična kultura. lahko shranite v stekleničkah s serumom.
Za izolacijo, kulturo in identifikacijo endotelijskih matičnih celic človeške popkovnične krvi in vzpostavitev brezceličnih žilnih odrov z izboljšano metodo zamrzovanja in odmrzovanja
Raziskati izvedljivost in klinično uporabno vrednost endotelijskih matičnih celic, izoliranih in gojenih iz človeške popkovnične krvi.
Metode: Odvzeta je bila popkovnična kri plodov, ki so bili podvrženi donošenemu carskemu rezu na Oddelku za porodništvo in ginekologijo, prve pridružene bolnišnice Bengbu Medical College, vstavljeno v stekleničko s serumom, ki vsebuje 50U/ml heparina v aseptičnih pogojih, shranjeni v 4-stopinjski ledeni škatli in prepeljani v celice V sobi za kulturo so bile mononuklearne celice popkovnične krvi pridobljene s centrifugiranjem z gradientom gostote. Dobljene mononuklearne celice smo razdelili na dva dela in dodali fetalni telečji serum M199 medij (FCS-M199) in avtologni serumski medij M199 (AS-M199). In bili so posejani v posode za kulturo s človeškim fibronektinom (HFN) in brez njih (označeno kot: F(0), F(1), A(0), A(1)). Izvedeni so bili in vitro indukcija, diferenciacija in ekspanzija.
Opažene so bile morfološke spremembe adherentnih celic med celotnim procesom indukcije in diferenciacije, ki so bile identificirane iz različnih zornih kotov v kombinaciji s sorodnimi tehnikami, kot so imunohistokemija, imunofluorescenca in pretočna citometrija.
Rezultati: Po 12 dneh kulture so se mononuklearne celice popkovnične krvi začele lepiti. Po 3d se je začela pojavljati vretenasta oblika, nato pa se je število adherentnih celic postopoma povečevalo in postopoma postalo vretenasto. Pri gojenju do enega tedna je nastala tipična kolonija z vretenastimi celicami okrog in okroglimi celicami v središču. Ko so bile celice gojene 14 dni, so se medsebojno povezani celični grozdi postopoma povezovali in tvorili mrežno strukturo. Hkrati so se z nenehnim podaljševanjem časa gojenja začele postopoma krajšati tudi dolge vretenaste celice, ki so pokazale tipično spremembo v obliki tlakovca.
Adherentne celice so gojili en teden in opazili so, da je bilo število celic v mediju s humanim fibronektinom bistveno večje kot brez človeškega fibronektina in ni bilo pomembne spremembe v številu celic v dveh različnih medijih.
