Osnovne zahteve za odvzem vzorcev
1. Vzorce hospitaliziranih primerov zbira medicinsko osebje bolnišnice, v kateri se nahajajo, vzorce tesnih stikov pa zbira lokalna imenovana agencija za nadzor bolezni in zdravstvena ustanova. Pri zbiranju vzorcev je treba glede na različne predmete zbiranja določiti različna območja vzorčenja. Bolniki z vročino gredo v klinike za vročino na zdravljenje in vzorčenje. Ustanove, ki nimajo klinik za vročino, bi morale vzpostaviti posebne prostore za vzorčenje za bolnike z vročino ter vzorčne bolnike z vročino in druge testne skupine, da se izognejo križišču. okužba. 2. Asimptomatsko okužene osebe, vstopno osebje in tesni stiki naj med izolacijo in opazovanjem odvzamejo brise nazofarinksa za testiranje nukleinske kisline. Ob sprostitvi izolacije je treba hkrati odvzeti dva vzorca brisa nazofarinksa, za testiranje pa je treba uporabiti različne reagente za odkrivanje nukleinske kisline. Načeloma sekundarno testiranje izvajajo različne institucije za testiranje. 3. Glede na potrebe kliničnega in laboratorijskega testiranja se lahko med hospitalizacijo in izolacijo odvzame več vzorcev, hkrati pa se lahko odvzame več vzorcev, kot so dihala, kri in blato. Osebje za vzorčenje mora pri zbiranju vzorcev strogo upoštevati specifikacije za vzorčenje, da zagotovi, da kakovost zbranih vzorcev izpolnjuje zahteve. Hkrati bi morali podrobno zabeležiti podatke o preiskovancu, za zbiranje ustreznih informacij pa lahko uporabijo skeniranje črtne kode in druge informacijske metode. 4. Za presejanje populacije je treba epruvete za vzorčenje določiti v skladu z zahtevami reagentov, ki se uporabljajo za ekstrakcijo in detekcijo nukleinske kisline, lahko pa se izberejo epruvete za vzorčenje, ki vsebujejo sredstva za inaktivacijo virusa (gvanidinske soli ali površinsko aktivne snovi itd.). Vzorec, uporabljen za izolacijo virusa, je treba dati v epruveto za vzorčenje, ki ne vsebuje sredstva za inaktivacijo virusa. 5. Predmeti in spremljanje okolja mora temeljiti na namenih spremljanja, preprečevanju in nadzoru pa je treba določiti elemente vzorčenja, lokacijo in količino, vzorčenje mora strogo upoštevati specifikacije za vzorčenje.
(4) Vrste zbranih osebkov. V vsakem primeru je treba zbrati vzorce akutnega dihalnega trakta (vključno z vzorci zgornjih dihal ali vzorci spodnjih dihal). V hujših primerih se najprej odvzamejo vzorci spodnjih dihalnih poti; vzorci blata, vzorci polne krvi, vzorci seruma in vzorci iztrebkov se lahko odvzamejo glede na klinične potrebe. Vzorec urina. Artikli in okoljski vzorci se zbirajo v skladu z zahtevami spremljanja.
Vrste vzorcev: 1. Vzorci zgornjih dihal: vključno z brisi nazofarinksa, brisi žrela itd. 2. Vzorci spodnjih dihalnih poti: izpljunek globokega kašlja, tekočina iz alveolarnega izpiranja, tekočina iz izpiranja bronhijev, aspirat dihalnih poti itd. 3. Vzorci blata/anal brisi: zbrati je treba približno 10 gramov (velikosti arašidov). Če ni primerno hraniti vzorcev blata, lahko vzamete analne brise. 4. Vzorec krvi: antikoagulantna kri, prostornina zbiranja je 5 ml, za zbiranje krvi priporočamo uporabo vakuumske krvne žile, ki vsebuje antikoagulant EDTA. 5. Vzorci seruma: poskusite zbrati dvojne vzorce seruma med akutno fazo in fazo okrevanja. Prvi serum je treba odvzeti čim prej (najbolje v 7 dneh po začetku bolezni), drugi serum pa v 3 do 4 tednih po začetku bolezni. Prostornina odvzema je 5 ml, priporočljiva je uporaba vakuumske epruvete za odvzem krvi brez antikoagulansa. Vzorci seruma se večinoma uporabljajo za določanje protiteles, brez detekcije nukleinskih kislin. 6. Vzorec urina: zberite jutranji urin, prostornina zbiranja je 2~3 ml. 7. Površinski vzorci: vključno z uvoženo hrano hladne verige ali uvoženim blagom na notranji in zunanji površini embalaže, pa tudi transportno in skladiščno orodje ter drugi deli, ki so lahko kontaminirani z zbiranjem razmazov. 8. Vzorci odplak: Glede na distribucijo drenažnega sistema velikih uvoženih lokacij za predelavo in obdelavo zamrznjenega blaga v morskem pristanišču, se osredotočite na izbiro odtoka odplak, zbiranja notranjega cevnega omrežja, dolvodnega toka odplak ali priključek na komunalno cevovodno omrežje itd. 2 do 3 točke Vzorčijo se biti.
(4) Zbiranje in obdelava vzorcev
1. Nazofaringealni bris: vzorčevalnik z eno roko nežno podpira glavo osebe, ki jo je treba vzeti, z drugo pa drži bris. Bris vstopi v nosnico in počasi gre globoko po dnu spodnjega nosnega prehoda. Ker je nosni prehod ukrivljen, to ni sprejemljivo. Prekomerna sila, da bi se izognili travmatični krvavitvi. Ko konica blazinice doseže zadnjo steno nazofaringealne votline, jo teden dni nežno vrtite (v primeru refleksnega kašlja ostanite nekaj časa), nato bris počasi vzemite in glavo blazinice potopite v 2–3 ml. raztopino za konzerviranje virusa (lahko tudi Uporabite izotonično fiziološko raztopino, tekočino tkivne kulture ali fosfatni pufer), zavrzite rep in tesno privijte pokrovček.
2. Bris žrela: oseba, ki jo vzamemo, si mora splakniti usta z običajno fiziološko raztopino, oseba, ki vzorči, pa mora bris navlažiti v sterilni fiziološki raztopini (prepovedano je dajati bris v raztopino za konzerviranje virusov, da se izognemo antibiotikom, ki povzročajo alergije), in oseba, ki jo zbirajo. Rahlo nagnite glavo, odprite usta in naredite"ah" zvok, izpostavite tonzile na obeh straneh, položite bris čez dno jezika, obrišite tonzile na obeh straneh osebe z malo sile vsaj 3-krat in nato obrišite gor in dol zadnje žrelo vsaj za 3-krat. Nato glavo brisa potopite v epruveto, ki vsebuje 2 do 3 ml raztopine za konzerviranje virusa (uporabite lahko tudi izotonično fiziološko raztopino, tekočino za tkivno kulturo ali raztopino fosfatnega pufra), zavrzite rep in tesno privijte pokrov epruvete. Bris žrela lahko damo tudi v isto cev kot bris nazofarinksa.
3. Nazofaringealni izvleček ali izvleček dihalnih poti: Za ekstrakcijo sluzi iz nazofarinksa ali izločanje dihalnih izločkov iz sapnika uporabite zbiralnik, povezan s črpalko z negativnim tlakom. Vstavite glavo zbiralnika v nosno votlino ali sapnik, vklopite podtlak, zavrtite glavo zbiralnika in počasi izvlecite, zberite izvlečeno sluz in enkrat sperite zbiralnik s 3 ml tekočine za vzorčenje (uporabite lahko tudi pediatrično kateter, priključen na 50 ml brizgo (Alternativni zbiralnik).
4. Izpljunek pri globokem kašljanju: Ko ima bolnik globok kašelj, zberite izkašljani sputum v epruveto za vzorčenje, ki vsebuje 3 ml tekočine za vzorčenje. Če se sputum ne zbere v tekočini za vzorčenje, lahko pred testom dodamo 2 do 3 ml tekočine za vzorčenje ali pa dodamo enako količino prebavnega soka izpljunka. Formula raztopine za shranjevanje prebavnega soka izpljunka je prikazana v tabeli 1.
Pri uporabi raztopino za shranjevanje razredčite na 50 ml z deionizirano vodo, jo zmešajte z enako količino izpljunka ali glejte navodila za uporabo reagenta ali uporabite enako količino sputuma s fosfatnim pufrom, ki vsebuje 1 g/L proteinazo K, za pretvorbo sputum .
5. Tekočina za izpiranje bronhijev: vstavite zbiralno glavo iz nosnice ali sapnika v sapnik (približno 30 cm globoko), injicirajte 5 ml normalne fiziološke raztopine, vklopite podtlak, zavrtite zbiralno glavo in počasi izvlecite, zberite ekstrahirano sluz, Enkrat sperite zbiralnik z raztopino za vzorčenje ali pa uporabite pediatrični kateter, povezan s 50 ml brizgo, da zamenjate zbiranje.
6. Alveolarna tekočina za izpiranje: po lokalni anesteziji vstavite fiberoptični bronhoskop skozi usta ali nos skozi žrelo v bronhus desnega srednjega režnja ali levega pljučnega jezičnega segmenta in z vrhom potrkajte v odprtino bronhialne veje ter ga počasi dodajte skozi biopsijsko luknjo sapnika. Bakterijska fiziološka raztopina, 30-50 ml vsakič, skupno 100-250 ml, ne sme presegati 300 ml.
7. Vzorec blata: Vzemite 1 ml raztopine za obdelavo vzorca, vzemite vzorec blata v velikosti sojinega fižola in ga dodajte v epruveto, nežno pihnite in posesajte 3 do 5-krat, pustite stati pri sobni temperaturi 10 minut, centrifugirajte pri 8000 vrtljajev na minuto 5 minut in absorbira supernatant. Odkrivanje. Raztopino za obdelavo fekalnih vzorcev lahko pripravite sami, formula pa je prikazana v tabeli 2.
Raztopino HANK'S ali drugo izotonično fiziološko raztopino, tekočino tkivne kulture ali raztopino fosfatnega pufra lahko uporabite tudi za raztapljanje vzorca blata za pripravo suspenzije blata. Če ima bolnik simptome driske, vzemite 3-5 ml vzorca blata, nežno pipetirajte, da premešate, centrifugirajte pri 8000 vrt/min 5 minut in absorbirajte supernatant za uporabo.
8. Analni tampon: S sterilno vatirano palčko ga nežno vstavite v anus 3–5 cm, nato ga nežno zavrtite ven, takoj vstavite v 15 ml epruveto za vzorčenje z zunanjim navojnim pokrovčkom, ki vsebuje 3–5 ml raztopine za zaščito virusa, zavrzite rep, in ga zavrti. Zategnite pokrov cevi.
9. Vzorci krvi: za zbiranje 5 ml vzorcev krvi priporočamo uporabo vakuumskih epruvet za odvzem krvi, ki vsebujejo antikoagulant EDTA. Glede na vrsto izbranih reagentov za ekstrakcijo nukleinske kisline za ekstrakcijo nukleinske kisline uporabite polno kri ali plazmo. Za ločevanje plazme 10 minut centrifugirajte polno kri pri 1500–2000 vrt/min in supernatant zberite v sterilno plastično epruveto z navojnim vrhom.
10. Vzorec seruma: Z vakuumsko epruveto za odvzem krvi z negativnim tlakom zberite 5 ml vzorca krvi, pustite pri sobni temperaturi 30 minut, centrifugirajte pri 1500-2000 vrt/min 10 minut in zberite serum v sterilno plastično epruveto z navojnim vrhom.
11. Površinski vzorci: Glejte metodo, priporočeno v"Tehnične specifikacije za spremljanje okolja novega koronavirusa na trgu kmetijske trgovine (Market Trade)" (WS/T776—2021). Ko je bris za vzorčenje popolnoma infiltriran z raztopino za konzerviranje virusa, ga ponovno nanesite na površino in nato nanesite bris. Vstavite ga nazaj v cev za vzorčenje in ga namočite, vzemite ga in ponovno nanesite vzorec, ponovite več kot 3-krat. Večtočkovno porazdeljeno vzorčenje se izvaja na objektih z velikimi površinami.
12. Vzorci odplak: Glejte metode, priporočene v"Tehnične specifikacije za spremljanje okolja novega koronavirusa na trgu kmetijske trgovine (Market Trade)" (WS/T776—2021). Pri zbiranju vzorca brisa odplake bris potopite v adsorbirano odplako in ga odstranite. Postavite cev za vzorčenje nazaj, da se namoči, jo vzemite in ponovno potopite v odplake, ponovite več kot 3-krat in izvedite večtočkovno porazdeljeno vzorčenje za vsako mesto vzorčenja odplak. Pri zbiranju vzorcev odpadne vode uporabite polietilenske plastične steklenice, da zberete 1L～1,5L odplake. Za zbiranje odplak, večje od 1,5 l, lahko uporabite polietilenska plastična vedra ali posebno opremo za obogatitev vzorcev vode na kraju samem. Pred odvzemom vzorcev odpadne vode jih je treba temeljito premešati in nato vzorčiti; če je odplake težko dobro premešati in pride do razslojevanja, lahko vzorčenje opravimo po plasteh glede na delež volumna vode posamezne plasti.
13. Drugi materiali: zbirajte v skladu z zahtevami in specifikacijami oblikovanja.
(5) Embalaža vzorca
Po zbiranju vzorcev se podpakira v biološko varnostno omarico laboratorija za biološko varnost druge stopnje.
1. Vse vzorce je treba postaviti v epruveto za zbiranje vzorcev ustrezne velikosti z navojnim pokrovom in tesnilom v notranjosti, ki je odporna proti zmrzovanju, in zategniti. Številka vzorca, vrsta, ime in datum vzorčenja so navedeni na zunanji strani posode. 2. Zapečatene vzorce dajte v zaprto vrečko, vsaka vrečka je omejena na en primerek. Zahteve za vzorčno embalažo morajo izpolnjevati ustrezne standarde"Tehničnih pravil za varen prevoz nevarnega blaga po zraku ". 3. Kadar gre za prevoz zunanjih osebkov, se troslojno pakiranje izvede glede na vrsto osebkov in kužne snovi razreda A ali B.
(6) Ohranjanje osebkov
Vzorce, ki se uporabljajo za izolacijo virusa in odkrivanje nukleinske kisline, je treba testirati čim prej. Vzorce, ki jih je mogoče testirati v 24 urah, lahko hranite pri 4°C; vzorce, ki jih ni mogoče zaznati v 24 urah, hranite pri -70 °C ali nižji temperaturi (če ne- Shranjujte pri 70 °C v hladilniku pri -20 °C). Vzorce seruma lahko hranite pri 4°C 3 dni, lahko pa jih hranite dlje časa pod -20°C. Za ločeno shranjevanje vzorcev je treba vzpostaviti posebne knjižnice ali posebne pulte.
(7) Oddajte vzorce na pregled
Vzorce je treba poslati v laboratorij čim prej po odvzemu, vzorcev pa ne smemo postaviti na sobno temperaturo (25°C) več kot 4 ure po odvzemu. Če je potreben prevoz na dolge razdalje, je za shranjevanje priporočljivo uporabiti suh led in druge načine hlajenja. Izogibajte se večkratnemu zamrzovanju in odmrzovanju med prevozom vzorca.
1. Pošljite vzorce
Vsi prvotni ali zgodnji primeri lokalnih epidemij, odkriti v različnih pokrajinah (avtonomne regije in občine), ključni primeri, povezani z epidemiologijo zgodnjih primerov, lokalni primeri z neznanimi viri okužbe, uvoženi primeri iz tujine, uvoženo blago in sorodno okolje pozitivni vzorci itd. Vsaj 2 vzorca je treba zbrati vzporedno, enega pošljemo vsaki provincialni agenciji za nadzor bolezni na testiranje, drugega pošljemo Kitajskemu centru za nadzor in preprečevanje bolezni na testiranje in pregled ter obrazec za oddajo vzorca je priložen (glej Dodatek 10-1). Nove reprezentativne seve, izolirane iz različnih provinc, je treba nemudoma poslati kitajskim centrom za nadzor in preprečevanje bolezni v pregled in ohranitev.
2. Prevoz vzorcev in sevov
(1) Domači prevoz novih sevov koronavirusa ali drugih potencialno nalezljivih bioloških materialov je razvrščen v razred A, ustrezna številka ZN pa je UN2814. Embalaža je v skladu s klasifikacijo PI620 dokumenta ICAO Doc9284"Tehnična navodila za varen prevoz nevarnega blaga po zraku" Zahteve za pakiranje: Okoljski vzorci spadajo v kategorijo B, ustrezna številka UN pa je UN3373. Embalaža ustreza klasifikacijskim zahtevam PI650 iz dokumenta ICAO Doc9284"Tehnična pravila za varen prevoz nevarnega blaga po zraku"; zgornjo standardno embalažo je mogoče uporabiti za prevoz z drugimi prevoznimi sredstvi. Prevoz novih sevov koronavirusa ali drugih potencialno nalezljivih materialov je treba izvajati v skladu z"Upravnim predpisom o prevozu vrst ali vzorcev visoko patogenih mikroorganizmov (virusov), ki lahko okužijo ljudi" (prej Odredba Ministrstva za zdravje št. 45) za"Potrdilo o prometnem dovoljenju" .
(2) Mednarodni prevoz Vzorci ali sevi novega koronavirusa, ki se prevažajo v mednarodnem prometu, se pakirajo na standardiziran način, opravijo ustrezne postopke v skladu z"Predpisom o upravljanju sanitarne in karantene vstopa in Zapustite posebne članke" in izpolnite ustrezne nacionalne in mednarodne zahteve.
(3) Prejem in upravljanje vzorcev in virusnih sevov. Z letalom prepeljani osebki prispejo na ciljno letališče in se s profesionalnimi transportnimi vozili odpeljejo do sprejemne enote. Po kopnem prevažajo osebke s profesionalnimi vozili. Prevozniki in prejemniki obravnavajo vzorce dvojnega znaka za prejem. Vzorce in seve novega koronavirusa bi morala upravljati posebna oseba, natančno beležiti vir, vrsto, količino in številko vzorcev in sevov, sprejeti učinkovite ukrepe za zagotovitev varnosti sevov in vzorcev ter strogo preprečevati zlorabe, zlonamerne uporabe, kraje in kraje. Rop, izguba, uhajanje in drugi incidenti.
02
Laboratorijsko testiranje novega koronavirusa
