Osnovni proces odkrivanja PCR novega koronavirusa
1. Zbirka vzorcev: hkratno zbiranje zgornjih dihal (vključno z nazofaringsom in orofaringsom) in spodnjim dihalnim traktom (vključno z izpuščajem, sapnikom, sapnikom ali bronhoalveolarno izlivno tekočino) vzorcev za nCoV odkrivanje z RT-PCR. Kadar so vzorci spodnjih dihalnih traktov lahko na voljo: za zbiranje vzorcev uporabite ustrezno PPE (opomba Vzorci URT za previdnostne ukrepe za kapljice in izpostavljenost ter vzorce LRT za previdnostne ukrepe v zraku) Pri zbiranju vzorcev URT uporabite vzorce za vzorčenje virusov (sterilni poliester ali rayon namesto bombaža) in nosilec za prenašanje virusov. Ne jemljejte vzorcev iz nosnice ali tonzil. Pri sumih na bolnike z nCoV, zlasti pljučnico ali hude bolnike, en vzorec URT ne more izključiti diagnoze, zato je priporočljivo povečati vzorce URT in LRT.
2. Ekstrakcija jedrtne kisline: instrument za ekstrakcijo jedrtne kisline ali ročno ekstrakcijo jedrtne kisline
1), ni potrebe po instrumentih, uporaba ročne ekstrakcije
Oprema in laboratorijski potrošni del, potreben za ekstrakcijo jedčne kisline in izoliranje vzorca:
biološke varnostne omare (funkcije: ločevanje vzorcev, zagotavljanje osebja, vzorcev in varstvo okolja),
Namizna visokohlajna hladilna centrifuga (funkcija: hitrost ≥ 12000RPM, analiza jedrskih kislin itd.),
Nizkotemperaturni hladilnik (funkcija: shranjevanje reagenta),
Kovinska kopel, pipeta (funkcija: natančno odmerjanje),
Sterilizirane centrifugne cevi (funkcija: ločevanje jedrnih kislin itd.),
Rokavice iz lateksa (funkcija: proti onesnaževanju),
Absolutni etanol, izopropanol, DNase in RNase brez vode (voda, ki ni obdelana z DEPC).
3. Avtomatski instrument za ekstrakcijo jedčne kisline: (avtomatsko ekstrakcijo je mogoče izvleči 32 vzorcev enkrat v 26 minutah)
Ujemajoca predhodno nameščena plošča je neposredno naložena in izvleček neposredno na stroju:
4. Kvantitativno zaznavanje fluorescencije PCR:
Zahtevana oprema in potrošni izdelki: biološka varnostna omara (funkcija: priprava vzorca, zagotavljanje osebja, vzorci in varstvo okolja),
Kvantitativni PCR instrument fluorescence (funkcija: zaznavanje in analiza PCR ojačevanja),
Namizna visokohlajna hlajena centrifuga (funkcija: hitrost ≥ 12000RPM),
Nizkotemperaturni zamrzovalnik (shranjevanje vzorca pri -86°C, shranjevanje reagenta pri -20°C in 4°C),
oscilator, (mešanica)
Diplomirani namigi za pipeto (funkcija: Natančno nalaganje), velikost 1-10ul
Sterilizirane centrifugne cevi (0,5/1,5/2ml),
0,2 ml optične stopnje PCR cevi/plošče (funkcija: PCR reakcijska cev),
Rokavice iz lateksa (funkcija: proti onesnaževanju).
Za ekstrakcijo jedrski kisline, konfiguracijo reakcijskega sistema in interpretacijo rezultatov veljajo navodila kompleta.
